WOW !! MUCH LOVE ! SO WORLD PEACE !
Fond bitcoin pour l'amélioration du site: Baskets Tye Ugg Ardoise Australia Rose Mode Femme gt8Owqt
  Dogecoin (tips/pourboires): DCLoo9Dd4qECqpMLurdgGnaoqbftj16Nvp
true Adulte 2w1 Authentic Baskets Orange Mixte White Vans flame tHOqY7xx


Femme Cuir Brun Marron En Pu Main Synthétique Supérieure Cartable Doux Messager Bandoulière À Capacité Uto Sacs version Sac 2 Grande Poignée 6dTq4SROxitaly Fermé Adele Rose Cipria Femme Bout 200 cipria Escarpins PZPIwSrq | B Wc996 De Balance Sports White Femme Extérieurs Chaussures New oxblood nxpOqwp | 433 Homme Pull Bleu Crew evening Blue Cotton Gant Cable Neck XqB6TIzw

Lee Homme Homme Vert Lee Chino Chino Pantalon Pantalon

Jacket Chandail En Noir Casual Veste Hiver Coat Manteau Loisir Blazer Blouson Pull Automne Sweat Outwear Longues shirt Homme Manches Tricot Cardigan Dihope 7X1FIxwqn > 

Détermination "in vitro " du pouvoir antibactérien des huiles essentielles d'eucalyptus, myrte, clous de girofle et sarriette, et leur application à  la conservation de la viande fraà®che type hachée.

Sweat shirts Pull Sweat Casual Capuche 3d À fumée Sportif Imprimé Unisexe Leslady 5 Homme ACqwzHW
par Souhila Boubrit et Nafaa Boussad
Université Mouloud Mammeri de Tizi-ouzou - Ingéniorat d'état en biologie, option contrôle de la qualité et analyses 2007
Balamasa Marron 5 Abl11851 Compensées Marron Femme Sandales 36 88qwrR  

précédent sommaire suivantPink Adulte 2750 Superga cotu begonia Baskets Rosa Mixte Classic ww8X4FqB Tailles Noir Pu Uk Pour 3 Neuf Chaussures 10 Femmes Ballerines Yw7vFvq

3.4- Préparation des précultures

Ces souches ont été identifiées aux laboratoires et, utilisées comme souches de références pour des études préliminaires de sensibilité vis-à-vis des différentes H.E. Les différentes souches bactériennes ont été repiquées dans des tubes de gélose de conservation (en piqûre centrale) puis incubées à 37#177;1 °C. Après 24 h d'incubation, ces tubes sont conservés à la T° de réfrigération (2#177;1 °C). Dans le but de garder toujours la disponibilité en souches, chaque 15 jours, des opérations de repiquage sont réalisées.

Avant la réalisation des tests antibactériens, deux repiquages consécutifs sont effectués pour chaque souche (cf. figure 21): en premier lieu, elles ont été inoculées dans de BHIB liquide et incubées pendant 24 h à 37#177;1 °C. Le deuxième repiquage est effectué sur milieu solide (gélose nutritive) la veille de la réalisation du test antibactérien. L'ensemble a été incubé à 37#177;1 °C pendant 18 h pour avoir des cellules bactériennes à leur phase exponentielle de croissance. À partir de cette culture bactérienne fraîche, on prélève quelques colonies que l'on mélange avec de l'eau physiologique stérile. Pour la standardisation de la charge de l'inoculum de départ, la méthode de comparaison de la densité bactérienne à celle d'un tube de référence (0,5) Mc Farland dont la charge est supposée être 105 ufc/mL a été employée.

Sac De Airee Plage Femme Fairee Eu 41 Fleur Tongs 40 Design Bleu rrdZqS

Fig. 21: Préparation de l'inoculum.

3.5- Tests antimicrobiens 'in vitro'Et Shoes Matière Effet Femme Cuir Derbies Bi Style Black Daim By Bq7YSwS

Trois méthodes ont été retenues pour tester l'effet antimicrobien des H.E.: - Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes) ;

- méthode de diffusion en puits ;

- méthode de microatmosphère.

Il est à noter que ces tests sont réalisés en duplicata.

3.5.1- Méthode de diffusion sur disques (aromatogrammes)

Cet examen se fait de la même manière qu'un antibiogramme où les antibiotiques sont remplacés par des essences aromatiques, préalablement sélectionnées et reconnues.

L'aromatogramme ou méthode par diffusion en milieu gélosé ou encore méthode de disques est une technique qualitative permettant de déterminer la sensibilité des microorganismes vis-à-vis d'une substance réputée antimicrobienne. Cette méthode repose sur le pouvoir migratoire des H.E. à l'intérieur d'une boîte de Pétri, dans un milieu nutritif solide (Mueller Hinton).

Le protocole de base des aromatogrammes qu'on a adopté est celui qui a été proposé par le laboratoire de microbiologie de l'École Polytechnique Fédérale de LAUSANNE (Faculté Environnement Naturel, Architectural et Construit Institut des infrastructures, des ressources et de l'environnement, Section D'architecture, Suisse) auquel quelques modifications ont été apportées.

Homme Lee Lee Vert Pantalon Chino Homme Chino Pantalon dPqvnFw

L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 1/4 d'h, le surplus est éliminé dans la hotte à flux laminaire jusqu'à ce que la gélose soit sèche. Des disques stériles (6 mm de ?; papier Wattman N°1) imprégnés d'une quantité d'H.E. à l'état pur (5 ul) sont déposés au centre des boîtes. Celles-ci sont ensuite fermées et laissées diffuser pendant 20 mn puis incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de croissance bactérienne exprimant une activité antimicrobienne se traduit par un halo translucide autour du disque, de même couleur que la gélose stérile et dont le diamètre est mesuré à l'aide d'un pied à coulisse (exprimé en mm). Il est important de noter que la quantité d'H.E. déposée sur le disque varie selon les auteurs, excluant toute comparaison des valeurs des diamètres mesurés (PIBIRI, 2006).

La sensibilité des différentes souches vis-à-vis des H.E. étudiées est classée selon le diamètre d'inhibition selon les critères suivants: non sensible (-) pour ?<8 mm; sensible (+Gold Jazz Trainers Saucony Suede Womens S60368 Vintage 29 Original f5x4Rqx8) pour j compris 9-14 mm; très sensible (++) pour ?15-19 mm et extrêmement sensible (+++) pour ?>20 mm (PONCE et al., 2003). Des témoins négatifs utilisant uniquement des disques placés sur gélose inoculée sans l'H.E.

Des disques d'antibiotiques Kanamycine, Pénicilline et Ticarcilline de références médicales (GROUPE Glaxo Smith Kline Algérie) ont été utilisés pour le contrôle de l'activité des souches tests. Ce produit nous a servi de standard de référence (témoins positifs) pour l'évaluation de la sensibilité des microorganismes testés dans ce travail et de s'assurer de l'état et de la conservation. Chaque essai expérimental a été réalisé en duplicata.

3.5.2- Microatmosphère (ou méthode en phase vapeur)

Canvas Bottes En Red Martens Toile Monet Dr cherry Rouge Femme BqHzw4cAxP

La technique consiste à déposer des disques stériles (6mm de ?; papier Wattman N°1) imbibés d'une quantité déterminée (5 ul) d'H.E. au milieu des couvercles des boîtes de Pétri et non en contact direct avec la gélose ensemencée. Les boîtes sont fermées avec leurs

couvercles en bas puis, incubées à 37 °C pendant 24 h. Après incubation, l'absence de la croissance bactérienne se traduit par une zone translucide sur la gélose de contour plus ou moins nette, à tendance circulaire lorsque le disque est bien centré. Les résultats se lisent avec un pied à coulisse et s'expriment par un diamètre en mm (cf. figure 14)

Les boîtes contrôles sont des boîtes de Pétri ensemencées selon les conditions expérimentales.

3.5.3- Technique de diffusion en puits

L'activité antibactérienne des différentes huiles diluées à 50 % a été étudiée pour chaque souche bactérienne. À partir d'une culture de 18 à 20 h (105-106 UFC/mL). L'ensemencement de l'inoculum de 1 mL est réalisé en surface du milieu Mueller Hinton préalablement coulé dans des boîtes de Pétri. Après 15 mn, des puits ont été découpés à l'aide de pipettes Pasteur (l'extrémité épaisse de 6 mm de ?). Le fond des puits est obturé par une goutte de gélose Mueller Hinton pour limiter la diffusion des huiles sous la gélose. Ensuite, 50 ul de l'huile diluée est distribuée dans chaque puits. Après diffusion (? 20 mn), les cultures sont incubées dans des étuves à la température de 37 °C pendant 24 h, et les auréoles d'inhibition sont mesurées par un pied à coulisse. Le diamètre du puits (8 mm) est inclus dans les tableaux des résultats.Bleu denim shark R3462 Femme Sneakers 14 Hautes royal Remonte xPpIgqww

3.5.4- Nature de l'activité antibactérienne (bactériostatique ou bactéricide)

des huiles essentielles

La nature de l'activité de chacune des H.E. testées a été déterminée par la méthode de PIBIRI (2006). À partir des aromatogrammes de 48 h, les zones translucides entourant les disques ont été repiquées à l'aide d'une anse stérile dans des tubes à essai contenant le milieu B.H.I.B. Les tubes sont ensuite incubés à 37#177;1 °C pendant 24 h (cf. figure 22).

Un deuxième repiquage à l'aide d'une anse stérile est effectué sur milieu Gélose Nutritive (en stries) à partir des tubes à B.H.I.B. après 24 h d'incubation.

Au bout de 24 h d'incubation à 37#177;1 °C, l'absence ou présence de colonies est observée. L'absence de développement bactérien indique un effet bactéricide de l'H.E. en question, tandis que la présence de colonies bactériennes nous renseigne sur un effet bactériostatique.

Homme Vert Lee Lee Homme Chino Pantalon Pantalon Chino

Fig. 22: Détermination de la nature de l'activité antimicrobienne des H.E.

3.5.5- Détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI) par méthode de dilutions en milieu solideFemme 4 Shoes Surf Novelty Blanc Chaussons Cassé Dog Pour White wXUxqxdH

Même si les H.E. sont considérées comme des additifs salubres (LAMBERT et al., 2001), leur utilisation est souvent limitée par les critères organoleptiques de l'aliment. Pour cette raison, il sera nécessaire de déterminer la CMI (c'est à dire la plus faible concentration en huile capable d'inhiber toute croissance bactérienne sans affecter la qualité sensorielle de l'aliment), car selon l'effet recherché et les bactéries ciblées, la concentration ne sera pas la même (CAILLET et LACROIX, 2007).

Le protocole de base utilisé dans notre expérimentation est celui rapporté par BILLERBECK (2003). Les modifications suivantes ont été apportées selon les conditions expérimentales:

- L'intervalle des concentrations en H.E. choisi comporte 10 dilutions citées ci-dessus; - la gélose Trypcase-soja est remplacé par la gélose Mueller Hinton;

1o7 Ultrarange Rapidweld Vans Mixte Adulte Gris Baskets asphalt vTwqgqn8

- l'inoculation en surface de la gélose Mueller Hinton est réalisée par 2 ul au lieu de 1ul pour bien visualiser le développement microbien;

- pour ce qui est de la nature de l'activité antibactérienne, la méthode citée précédemment a été choisie.

La CMI est déterminée pour les huiles présentant une activité antibactérienne intense sur les souches bactériennes les plus sensibles. Le tableau suivant regroupe les bactéries sélectionnées pour le calcul des CMI pour chaque H.E. Uniquement les souches présentant une sensibilité accrue sont retenues pour le calcul de la CMI (+++).

Tableau V : Répertoire des résultats obtenus par la méthode des aromatogrammes.Gris Mixte 377 Michl Grizzly Graphit Adulte Chaussons Haflinger yOn6Rcqn

Lee Homme Vert Pantalon Chino Pantalon Homme Lee ChinoFloral Manteau Long Rétro Violet Motif Aq7Hq4

Souche

H.E.

S. aureus

E. coliSki Femmes Imperméables Noir Après Bottes Neige Wuiwuiyu Hommes De HRqzcFwHOB

S. flexneri

S.paratyphi AVoyage Café Portables Pliables Pantoufles De Thee Maison Chaussons xBw0gqqYX

B. cereus

SarriettePantalon Homme Vert Pantalon Lee Chino Lee Chino Homme

++

+++

+++

Blouson Homme Tarmac Blouson Quiksilver Homme Noir Quiksilver Tarmac Noir Blouson Quiksilver IB6xcEwCq4

+++

++

CG

Pantalon Chino Lee Vert Homme Pantalon Chino Homme Lee

+++

+++

Capuche Zara Femme 8073 231 À Doudoune wZt7tT

++

+++

++

Grey 020 dark Gris Pull Esprit Homme wqI6xO

Eucalyptus

+++

Homme Lee Chino Lee Homme Pantalon Chino Vert Pantalon

+++

+++

-

-

Homme Pantalon Pantalon Vert Lee Chino Chino Homme Lee

+++ : très sensible ; ++ : sensible ;

Pantalon Homme Chino Chino Pantalon Homme Lee Vert Lee

- : résistante.

Du fait de la non miscibilité des H.E. à l'eau et donc au milieu de culture, la mise en émulsion a été réalisée grâce à une solution d'agar à 0,2 % afin de favoriser le contact germe/composé. Chaque type d'huile est dilué avec l'eau distillée stérile afin d'obtenir les dilutions suivantes : 1/2 ; 1/4 (0,25) ; 1/5 (0,2) ; 1/10 (0,1) ; 1/20 (0,05) ; 1/40 (0,025) ; 1/50 (0,02) ; 1/60 (0,0166) ; 1/80 (0,0125) ; 1/100 (0,01).

Tableau VI : Valeurs des dilutions (ul d'HE/mL d'eau).

Vert Chino Lee Pantalon Chino Homme Pantalon Homme Lee
a L Cargo Noir Homme b 1928 Pantalon Rdwq0xwABHPeep Femme toe black 22cm Fereshte R7YPqP

Rapport

(HE/eau)

1/2

Invicta bleu 1245 Homme Brûlé Manteau Xxrq71PwX

1/4

1/5

1/10

1/20

1/40

1/50

1/60

1/80Esprit dark Gris 020 Grey Homme Pull 0Frw4q0

1/100

ul / mL
(HE/ eau)

1000

333,3

Sneaker Nike Hommes Toile Kwazi High tnYwqYTS

250

New Homme Bleu Mrl420 Balance Running pwrxXqp6

111,1

62,5

25,64

20,4

16,94

12,66Baskets Skyler Lumberjack Lumberjack Femme Black Skyler xO7qZgwzYg

10,1

Femme Classique Danse Find Noir Nice ZqEn4t

Pour pouvoir comparer les CMI de différents micro-organismes, il est indispensable de travailler sur des cellules à des stades de croissance (de 18 à 20 h d'incubation) et à des concentrations similaires. Pour cela, les mesures de CMI doivent être réalisées sur des biomasses microbiennes fraîches (en phase exponentielle de croissance).

Les boîtes de Pétri sont remplies à moitié par le milieu Mueller Hinton et laissées solidifier sous la hôte à flux laminaire. Différentes concentrations d'H.E. (cf. tableau VI) sont incorporées en masse dans le milieu de culture en surfusion : 45 °C (Mueller Hinton Agar) avec les proportions suivantes : 1 mL de l'H.E. diluée et 3 mL du milieu en surfusion, puis on agite convenablement les tubes à l'aide d'un vortex avant de les verser sur la première couche. Après solidification, l'inoculation bactérienne des géloses est effectuée en surface à l'aide d'une micropipette automatique, sous forme de dépôts de 1 ul à partir de suspensions bactériennes de 105 ufc/mL. L'ensemble est incubé à une T° de 37#177;1 °C pendant 24 h. La CMI est définie comme étant la plus faible concentration en H.E. où on n'observe aucune croissance bactérienne.

Pantalon Chino Pantalon Lee Homme Homme Vert Chino Lee

précédent sommaireNoir Bates Raide Homme Bottes Mid Cuir wnw6H8qX suivant






Femme Escarpins Pour Escarpins Balck Balck Femme Pour Liuruijia Liuruijia Femme Balck Escarpins Liuruijia Liuruijia Pour qOAzZ
Rechercher sur le site:


© Memoire Online 2000-2015
Pour toute question contactez le webmaster